Identificación de aislamientos de Leptospira por métodos serológicos y genéticos

Autores: Victoria Martínez Berta, Fernández Molina Carmen, Rodríguez González Islay, Obregón Fuentes Ana Margarita, Rodríguez Silveyra José Enrique

Resumen

Se estudiaron 18 cepas de Leptospira, aisladas de pacientes con leptospirosis humana de 3 provincias de Cuba, empleando métodos serológicos y genéticos. Las cepas fueron agrupadas por aglutinación microscópica (MAT), con 8 antisueros policlonales. Se utilizaron 9 anticuerpos monoclonales (AcMs) para determinar el serovar de las cepas. Alternativamente se realizó la extracción del ADN de estas cepas y fue amplificado por un sistema de reacción en cadena de la polimerasa descrito para leptospiras patógenas. El ADN amplificado fue digerido con las enzimas de restricción Alu I y Hae III. Por MAT las cepas fueron agrupadas entre los serogrupos Ballum, Pomoma, Canicola e Icterohaemorrhagiae. Se determinó el serovar de 7 de las cepas estudiadas con el uso de los AcMs. Para la totalidad de las cepas se obtuvo por reacción en cadena de la polimerasa un fragmento amplificado de 631 pb. El análisis con enzimas de restricción del producto amplificado, originó iguales patrones de restricción en todas las cepas estudiadas. Los métodos utilizados permitieron la identificación a diferentes niveles de todas las cepas estudiadas, se señala que el uso de los AcMs hizo posible tipificar hasta serovar a 7 de las cepas.

Palabras clave: Leptospira/aislamiento & purificación leptospira/crecimiento & desarrollo tests serológicos leptospirosis/diagnóstico leptospirosis/prevención & control tests de aglutinación.

2003-01-14   |   848 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 54 Núm.1. Enero-Abril 2002 Pags. 48-51. Rev Cubana Med Trop 2002; 54(1)